光譜紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種廣泛應(yīng)用于物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域的分析儀器。它基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析。
一、結(jié)構(gòu)
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室和檢測(cè)系統(tǒng)組成。
光源系統(tǒng):光源是提供符合要求的入射光的裝置??梢?jiàn)光區(qū)常用的光源為鎢燈,紫外光區(qū)常用的光源為氫燈或氘燈。鎢燈可發(fā)射325~2500nm的連續(xù)光譜,適宜的使用波長(zhǎng)范圍為320~1000nm。氘燈發(fā)出的光的波長(zhǎng)范圍為190~400nm,使用波長(zhǎng)范圍一般為190~360nm。
單色器系統(tǒng):?jiǎn)紊魇菍⒐庠窗l(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光的裝置。它主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成。色散元件是單色器的主要部件,常用的色散元件是棱鏡和光柵。棱鏡單色器利用不同波長(zhǎng)的光在棱鏡內(nèi)的折射率不同將復(fù)合光色散為單色光。光柵單色器則是利用光的衍射與干涉作用制成的,具有更高的分辨率和更寬的波長(zhǎng)范圍。
樣品室:樣品室用于盛裝待測(cè)液并決定待測(cè)溶液透光液層厚度的器皿,又稱比色皿。常用的吸收池規(guī)格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。玻璃吸收池用于可見(jiàn)光區(qū)測(cè)定,石英吸收池用于紫外光區(qū)的測(cè)定。
檢測(cè)系統(tǒng):檢測(cè)器是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置。測(cè)量吸光度時(shí),將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測(cè)量,這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測(cè)器。常用的檢測(cè)器有光電池、光電管、光電倍增管和光電二極管陣列檢測(cè)器。光電倍增管不僅靈敏度高,而且響應(yīng)速度快,目前中、高檔分光光度計(jì)中一般采用它作為檢測(cè)器。
二、工作原理
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理是由光源發(fā)出連續(xù)輻射光,經(jīng)單色器按波長(zhǎng)大小色散為單色光,單色光照射到吸收池,一部分被樣品溶液吸收,未被吸收的光經(jīng)檢測(cè)器的光電管將光強(qiáng)度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)變化,并經(jīng)信號(hào)顯示系統(tǒng)調(diào)制放大后,顯示或打印出吸光度A(或透射比T),完成測(cè)定。
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。通過(guò)分析物質(zhì)的吸收光譜,可以研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用。
三、應(yīng)用
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中有著廣泛的應(yīng)用。在化學(xué)領(lǐng)域,它可以用于測(cè)定溶液中物質(zhì)的濃度、研究化學(xué)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)、分析有機(jī)物和無(wú)機(jī)物的結(jié)構(gòu)等。在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,它可以用于測(cè)定蛋白質(zhì)、核酸、酶等生物大分子的濃度和活性,研究藥物與生物分子的相互作用等。在環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域,它可以用于監(jiān)測(cè)水體、大氣中的污染物濃度,評(píng)估環(huán)境質(zhì)量等。
